4■◆★◆. 建议采用多通道移液器◆◆★◆，减少平行孔间的误差，加 CCK-8 时，建议斜贴着培养板壁加■■，不要插到培养基液面下加，容易产生气泡，干扰 OD 值◆■◆★◆★。

　　1. 第一次做实验时，建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。

　　A◆★：CCK 稳定性高◆■，避光条件 -20℃ 有效期 2 年，4℃ 有效期 1 年。经常使用建议 4℃ 保存■■◆★◆★，避免反复冻融。CCK 正常颜色为粉红色★◆★◆■，若颜色发生明显偏差，质量可能有发生变化。

　　2. 接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不一致★◆◆★◆★。

　　答◆◆：可以采取 2 个办法：1、适当增加细胞数量◆★■■■★；2★★★、延长加入 CCK-8 试剂后的反应时间■■。

　　不仅如此，CCK-8 对细胞的毒性极小■★◆★◆，完全可以测完细胞增殖或药物毒性后再继续用细胞进行下游实验★◆◆■★。下面就来为大家介绍一下 CCK-8 的具体情况。

　　3. 培养板周围一圈孔培养液容易挥发，为减少误差，建议培养板周围的四边每孔只加培养基★■■★■◆。

　　答：可以缩短加入 CCK-8 后的培养时间。例如■★★■：可以把加入 CCK-8 试剂后的培养时间由 2 小时缩短为 1 小时◆◆◆。此外★■★，可适当减少细胞的数量■■★◆。